摘要： 为建立一种快速检测鹅星状病毒（Goose astrovirus，GAstV）Ⅰ型（GAstV-1）与Ⅱ型 （GAstV-2）的 SYBR GreenⅠ双重实时荧光定量 PCR 检测方法，试验根据 GAstV-1 的 ORF1a 特异保守序列与 GAstV-2 的 ORF2 特异保守序列分别设计 1 对引物，将 PCR 扩增的两个片段 分别克隆至 pMD18-T载体，构建重组质粒作为阳性质粒标准品，建立检测并鉴别 GAstV-1与 GAstV-2 的 SYBR GreenⅠ双重实时荧光定量 PCR 方法，并对该方法的特异性、灵敏性、重复 性进行评估，并运用该方法对 28 份疑似痛风雏鹅临床样品进行检测。结果显示：建立的 SYBR GreenⅠ双重实时荧光定量 PCR方法检测 GAstV-1、GAstV-2的标准曲线相关系数均在 0.99以上，批间、批内重复变异系数均小于0.7%，最低检测限度均为10 copies/μL；该方法对鸭 肝炎病毒、禽流感病毒、鹅细小病毒均无特异性扩增，同时检测GAstV-1与GAstV-2未出现交 叉反应；该方法检测28份临床样品的GAstV阳性率为92.8%，其中GAstV-1和GAstV-2均为阳 性的有 6份，仅 GAstV-2阳性的有 18份，仅 GAstV-1阳性的有 2份。研究表明，建立的荧光定 量PCR检测方法可用于GAstV-1与GAstV-2的鉴别检测，并且当前引发GAstV感染的主要病 原依然是GAstV-2，GAstV-1和GAstV-2混合感染情况也同时存在。

关键词: 鹅星状病毒；GAstV-1；GAstV-2；双重荧光定量PCR；雏鹅；痛风

中图分类号: 

• S855.3