中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (10): 89-96.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.10.011

• 预防兽医 • 上一篇    下一篇

鸡pro-IL-1β表达、多克隆抗体制备 与初步应用

许萌萌1,2,3*,黄萌萌2,3*,牛鑫鑫2,3,王国栋sup>2,3,于航博sup>2,3,张玉龙sup>2,3,韩京哲1,2,3,韩金泽1,2,3,刘润杭2,3,吴子文2,3,于晓雪1,王笑梅2,3,高玉龙2,3**,李留安1**,祁小乐2,3**   

  1. (1.天津农学院动物科学与动物医学学院, 天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室,天津 300384; 2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 动物疫病防控全国重点实验室禽免疫抑制病创新团队,黑龙江哈尔滨 150069; 3.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所, 世界动物卫生组织传染性法氏囊病参考实验室,黑龙江哈尔滨 150069)
  • 出版日期:2024-10-15 发布日期:2024-10-15
  • 作者简介:许萌萌(1999-),女,硕士研究生,研究方向为禽免疫抑制病,E-mail:13361324515@163.com;黄萌萌(1993-),女,博士研究生, 研究方向为禽免疫抑制病,E-mail:1401849751@qq.com

  • Online:2024-10-15 Published:2024-10-15

摘要: 为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制,试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β 前体(Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β)基因,原核表达和纯化 pro-IL-1β 蛋白,用纯化的 pro-IL-1β 蛋白免疫小鼠制备 pro-IL-1β 多克隆抗体,对该抗体进行 ELISA 效价检测和鉴定, 并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验和Western blot试验中的应用效果。结果显示:重组 蛋白 pro-IL-1β 成功表达,分子量约 37 ku,能与 His 标签抗体发生特异性结合反应;获得了 ELISA 效价高于 1∶32 000 的鼠抗 pro-IL-1β 多克隆抗体,该抗体可通过间接免疫荧光试验 (IFA)检测到pro-IL-1β真核表达蛋白,也可通过Western blot试验检测到pro-IL-1β原核表达 蛋白和真核表达蛋白,还可通过Western blot和IFA检测到传染性法氏囊病病毒(IBDV)诱发的 巨噬细胞 HD11内源性 pro-IL-1β蛋白的表达。研究表明,试验成功制备鸡 pro-IL-1β多克隆 抗体,为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。

关键词: 鸡;pro-IL-1β;克隆;表达;多克隆抗体;炎症

中图分类号: