中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (10): 89-96.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.10.011
许萌萌1,2,3*,黄萌萌2,3*,牛鑫鑫2,3,王国栋sup>2,3,于航博sup>2,3,张玉龙sup>2,3,韩京哲1,2,3,韩金泽1,2,3,刘润杭2,3,吴子文2,3,于晓雪1,王笑梅2,3,高玉龙2,3**,李留安1**,祁小乐2,3**
摘要: 为研究禽类疫病病原触发炎症的分子机制,试验克隆和分析鸡源白细胞介素-1β 前体(Interleukin-1β precursors,pro-IL-1β)基因,原核表达和纯化 pro-IL-1β 蛋白,用纯化的 pro-IL-1β 蛋白免疫小鼠制备 pro-IL-1β 多克隆抗体,对该抗体进行 ELISA 效价检测和鉴定, 并初步测试了该抗体在间接免疫荧光试验和Western blot试验中的应用效果。结果显示:重组 蛋白 pro-IL-1β 成功表达,分子量约 37 ku,能与 His 标签抗体发生特异性结合反应;获得了 ELISA 效价高于 1∶32 000 的鼠抗 pro-IL-1β 多克隆抗体,该抗体可通过间接免疫荧光试验 (IFA)检测到pro-IL-1β真核表达蛋白,也可通过Western blot试验检测到pro-IL-1β原核表达 蛋白和真核表达蛋白,还可通过Western blot和IFA检测到传染性法氏囊病病毒(IBDV)诱发的 巨噬细胞 HD11内源性 pro-IL-1β蛋白的表达。研究表明,试验成功制备鸡 pro-IL-1β多克隆 抗体,为进一步研究禽病病原诱发炎症的分子机制提供了重要工具。
中图分类号: