鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2024.05.008

中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (5): 56-61.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.05.008

鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定

韩顺子^1，2,3，黄霞^1，2,3，孟闯^1，2,3，耿士忠^1，2,3，康喜龙^1，2,3*，潘志明^1，2,3，焦新安^1，2,3

（1.扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室，江苏扬州 225009； 2.扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子（动物源）控制重点实验室，江苏扬州 225009； 3.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州 225009）

出版日期:2024-05-15 发布日期:2024-05-07
作者简介:韩顺子（1999-），女，硕士研究生，研究方向为家禽免疫学，E-mail：erinhanhh@163.com

Online:2024-05-15 Published:2024-05-07

摘要/Abstract

摘要： 试验旨在获得具有生物活性的鸡白细胞介素-2（ChIL-2）重组蛋白。试验以克隆获得的 ChIL-2 基因为模板，分别构建原核重组表达菌 BL21（pCold-ChIL-2）和 BL21（pGEX- 6P-1-ChIL-2），进行诱导表达和纯化；通过BrdU ELISA法检测重组蛋白诱导鸡脾脏淋巴细胞的增殖情况，评估其生物活性；以 rHis-ChIL-2免疫小鼠制备多克隆抗体。结果显示：成功构建了原核重组表达菌 BL21（pCold-ChIL-2）、BL21（pGEX-6P-1-ChIL-2）；经表达纯化后分别获得纯度较高的 rHis-ChIL-2和 rGST-ChIL-2蛋白，大小分别为 14 ku和 39.4 ku；rHis-ChIL-2 和 rGST-ChIL-2 蛋白分别能够促进脾脏淋巴细胞显著或极显著增殖（P<0.01 或 P<0.001），均具有良好的生物活性；以纯化的 rHis-ChIL-2免疫小鼠制备的多克隆抗体效价为 5.12×105 ，可识别rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2，与真核表达的ChIL-2蛋白反应。结果表明，原核表达的重组蛋白 ChIL-2具有良好的生物活性，采用其制备的多克隆抗体可识别真核表达的 ChIL-2蛋白，为后期ChIL-2的检测奠定基础。

中图分类号:

S855.3

韩顺子，黄霞，孟闯，耿士忠，康喜龙，潘志明，焦新安. 鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定[J]. 中国家禽, 2024, 46(5): 56-61.

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