摘要： 为研究鸡S-腺苷甲硫氨酸基区域蛋白2（RSAD2）生物学功能，试验构建原核表达重组质粒pGEX-RSAD2，采用SDS-PAGE、Western blot验证RSAD2融合蛋白的表达，将融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。扩增RSAD2基因克隆至pFsatBac dual真核表达载体，重组质粒经转座、蓝白斑筛选后，获得重组杆状病毒质粒pFastBac-RSAD2，重组杆粒转染至sf9昆虫细胞后收获重组杆状病毒rBac-RSAD2。用鸡传染性贫血病毒（CIAV）感染孵育RSAD2蛋白的MDCC-MSB1细胞，通过荧光定量 PCR 检测病毒在细胞中的增殖情况。结果显示：成功构建原核表达质粒pGEX-RSAD2，诱导表达了69 ku的RSAD2融合蛋白，制备的多克隆抗体能够与表达RSAD2蛋白的DF-1细胞特异性结合；重组杆状病毒rBac-RSAD2能够引起sf9细胞病变，且感染后的sf9细胞与制备的RSAD2多克隆抗体能够特异性结合，rBac-RSAD2表达了43 ku的RSAD2蛋白；相较 对照组，孵育蛋白后的 MDCC-MSB1 细胞中的病毒载量降低。研究表明，成功构建了表达鸡RSAD2蛋白的重组杆状病毒rBac-RSAD2，其表达的RSAD2蛋白能够抑制CIAV增殖。

关键词: 鸡；RSAD2；多克隆抗体；杆状病毒；真核表达

中图分类号: 

• S855.3