禽脑脊髓炎病毒外壳蛋白VP1的原核表达及活性鉴定

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2022.10.007

中国家禽 ›› 2022, Vol. 44 ›› Issue (10): 38-43.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2022.10.007

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禽脑脊髓炎病毒外壳蛋白VP1的原核表达及活性鉴定

胡亚歌¹，吴海洋²，翟庆贺¹，牛晓赛¹，董新荣¹，卢尧³，杨灵芝¹，郭建友¹，朱杰^1*

（1.山东滨州沃华生物工程有限公司，山东滨州 256600；2.山东新希望六和集团有限公司，山东青岛 266100；3.东台市富安镇农业农村局，江苏盐城 224222）

发布日期:2022-10-14
作者简介:胡亚歌（1990-），男，硕士，兽医师，主要从事禽用生物制品研究，E-mail：yagehu123@163.com

Published:2022-10-14

摘要/Abstract

摘要： 为研究禽脑脊髓炎病毒(Avian encephalomyelitis virus，AEV)外壳蛋白VP1的免疫原性，研究根据AEV-187株VP1基因序列，设计一对表达引物，利用RT-PCR扩增获得了828 bp片段，成功构建表达质粒pET-32a-VP1，将质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，获得工程菌株pET-32a-VP1-BL21（DE3），经IPTG诱导后，采用SDS-PAGE、Western blot检测VP1蛋白的表达形式及反应活性；采用表达的VP1蛋白制备疫苗免疫SPF鸡，检测免疫后血清中AEV抗体水平。结果显示：VP1蛋白为部分可溶性表达，分子量为50 ku；与AEV阳性鸡血清能够发生反应；采用VP1蛋白制备的疫苗安全性良好，免疫SPF鸡后14 d即可检测到AEV抗体，免疫后21 d和28 d的抗体水平有大幅度增长，阳性率达到80%，证明表达的VP1蛋白具有免疫原性。综上所述，原核表达的VP1蛋白具有良好的抗原活性，为AEV亚单位疫苗的研制奠定了基础。

中图分类号:

S855.3

胡亚歌，吴海洋，翟庆贺，牛晓赛，董新荣，卢尧，杨灵芝，郭建友，朱杰. 禽脑脊髓炎病毒外壳蛋白VP1的原核表达及活性鉴定[J]. 中国家禽, 2022, 44(10): 38-43.

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