摘要: 为了对鸡传染性支气管炎(IB)疫苗的免疫效果进行有效评估,研究以QX型IBV的Vero细胞适应株为包被抗原,对检测条件进行优化,建立了IBV抗体间接ELISA检测方法。结果显示:抗原最佳包被浓度为160 μg/mL,最佳包被条件为37 ℃、2 h,封闭条件为5%脱脂奶粉、37 ℃封闭2 h,最佳抗体稀释液选择2%脱脂奶,一抗的最佳反应条件为37 ℃、60 min,二抗的最佳稀释度为1∶10 000,作用时间为60 min,底物显色时间为15 min;特异性、重复性试验证明,该方法与其他病原无交叉反应,特异性好,批内、批间变异系数较低,重复性好。研究初步建立了IBV抗体间接ELISA检测方法,可应用于免疫鸡群后抗体水平监测及早期感染预警。
中图分类号: