摘要： 研究旨在对鸡胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESC）向鸡精原干细胞（Spermato?gonial stem cells，SSC）分化过程中显著差异基因——丝裂原活化蛋白激酶8（Mitogen-activatedprotein kinase 8，MAPK8）进行生物信息学分析，验证MAPK8慢病毒干扰载体活性及干扰效率，为后期验证MAPK8在ESC向SSC分化过程中的调控方式以及功能研究奠定基础。试验采用RNA-seq和qRT-PCR分析和检测鸡ESC、PGC和SSC的差异表达基因；利用生物信息学在线预测软件对其进行理化性质及结构特征分析；比较鸡MAPK8基因序列与其它物种的同源性并进行组织表达谱检测；验证MAPK8慢病毒干扰载体的活性与干扰效率。结果显示：MAPK8在SSC上特异高表达；生物信息学分析显示鸡MAPK8是一种亲水性的无信号脂溶性蛋白，存在2个N-糖基化位点、13个O-糖基化位点和45个磷酸化位点，与其它物种高度同源（序列一致性达到80%），保守性较高；表达谱分析发现其在性腺中高表达；MAPK8慢病毒干扰载体能够稳定表达EGFP荧光蛋白且shRNA-1干扰效率最佳。该结果为深入探究MAPK8在鸡ESC向SSC分化过程中的功能奠定了基础。

关键词: 鸡；MAPK8；生物信息学分析；慢病毒干扰载体

中图分类号: 

• S831.2