B亚群禽白血病病毒GX14FF03株
感染性克隆构建与拯救

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2020.04.006

中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (4): 29-33.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.04.006

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B亚群禽白血病病毒GX14FF03株感染性克隆构建与拯救

赵亚楠¹，石梦雅²，李海娟²，林璐璐²，王培坤^1*，韦平^2*

（1.临沂大学微生物与宿主健康研究所，山东临沂 276005； 2.广西大学养禽与禽病学研究所，广西南宁 530004）

发布日期:2021-12-02
作者简介:赵亚楠（2000-），女，本科生，专业方向为动物医学，E-mail：1429534422@qq.com

Published:2021-12-02

摘要/Abstract

摘要： 为探究从灵山土鸡分离的携带 J 亚群禽白血病病毒（ALV）U3 区片段的 B 亚群 ALV（ALV-B）毒株GX14FF03的致病性，试验以GX14FF03毒株核酸为模板，采用PCR方法分 2段扩增病毒的cDNA，PCR扩增产物经克隆、酶切后依次连接到pBluescriptⅡ KS（+）质粒，最终获得一个含有ALV-B完整前病毒cDNA的重组质粒pBlue-GX14FF03。重组质粒转染DF-1 细胞进行病毒拯救，拯救病毒在DF-1细胞盲传3代后收集细胞上清液保存于-80 ℃，细胞固定后用于间接免疫荧光检测。另取保存细胞上清进行ALV p27抗原检测。间接免疫荧光检测结果及ALV p27抗原检测结果全部为阳性。拯救病毒及亲本病毒接种DF-1细胞后进行体外复制能力测定，结果显示拯救病毒在1、3、5、7、9 d体外复制能力与亲本病毒基本一致，差异不显著（P>0.05）。上述结果表明病毒拯救成功，命名为rGX14FF03。

中图分类号:

S855.3

赵亚楠，石梦雅，李海娟，林璐璐，王培坤，韦平. B亚群禽白血病病毒GX14FF03株感染性克隆构建与拯救[J]. 中国家禽, 2020, 42(4): 29-33.

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