摘要： 试验旨在探究视黄酸介导的Stra8信号在生殖细胞发生过程中的作用和调控机 制。以如皋黄鸡睾丸cDNA为模板扩增Stra8基因CDS区，并与pET-28a载体相连获得原核重 组表达载体pET-28a-Stra8，然后转染大肠杆菌BL21感受态，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 （IPTG）诱导外源基因表达，离心收集菌液，并用超声波破碎等方法收集表达的蛋白，用纯化的 蛋白作为抗原制备兔源抗体，产生带有免疫抗体的兔血；取全血，经血凝离心等步骤后获取血 清，通过SDS-PAGE检测抗体的纯度，将获得的含有多克隆抗体的血清进行ELISA检测效价。 结果显示：成功构建pET-28a-Stra8重组载体，IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中表达，表达产 物经 SDS-PAGE 分析后显示，STRA8 蛋白大小约为 55 ku；ELISA 检测显示在血清稀释比为 1∶256 000时P/N=3.3>2.1，达到阳性血清合格标准；Western blotting结果显示制备的多克隆抗 体血清可结合STRA8蛋白，该结果为进一步研究Stra8在生殖细胞发生过程中的作用和调控 机制提供了基础。

关键词: Stra8；原核表达载体；IPTG诱导；多克隆抗体

中图分类号: 

• S831.2