摘要： 研究旨在利用生物信息学技术分析Rbbp5 基因的生物学特征，构建过表达载体， 为研究其在鸡生殖干细胞中的调控模式提供试验材料，以探讨其作为组蛋白甲基化修饰酶发 挥作用的具体机制。试验利用多种在线工具分析RBBP5的氨基酸序列、保守结构域、亲疏水 性、跨膜结构域和信号肽表达，预测其二级、三级结构，进行互作蛋白的预测；采用双酶切和测 序鉴定重组载体pcDNA3.1-Rbbp5-Gst；qRT-PCR验证重组载体在PGCs中的表达。结果显示： RBBP5蛋白含有高度保守的结构域——WD40，内含7段典型的WD40重复序列，其亲水性高、 不含跨膜结构域、无信号肽表达，可用以构建过表达载体；同源建模和互作蛋白预测显示 RBBP5 高度保守，互作蛋白为ASH2L、WDR5、DPY30 和MLL2 等；双酶切和测序结果表明， Rbbp5 成功插入pcDNA3.1载体，未出现移码和突变；qRT-PCR结果显示PGCs中重组载体可使 Rbbp5 过量表达。结果为探明Rbbp5 在鸡原始生殖细胞形成中的功能和机制研究提供了试验 素材和理论依据。

关键词: Rbbp5；鸡；过表达载体；原始生殖干细胞

中图分类号: 

• S831.2