中国家禽 ›› 2021, Vol. 43 ›› Issue (5): 21-26.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2021.05.004

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鸽胚胎嗉囊成纤维细胞的分离培养及鉴定

葛平壮,倪爱心,边世雄,王攀林,李云雷,袁经纬,孙研研,麻慧*,陈继兰*   

  1. (中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 农业农村部动物遗传育种与繁殖重点实验室,北京100193)
  • 发布日期:2021-05-12
  • 作者简介:葛平壮(1995-),男,硕士研究生,研究方向为家禽遗传育种与繁殖,E-mail:gepingzhuang@163.com

  • Published:2021-05-12

摘要: 为探究鸽嗉囊成纤维细胞的体外分离及培养方法,研究选择17日胚龄的鸽嗉囊 组织,采用胰酶消化法和组织块贴壁培养法进行原代细胞分离,通过差速贴壁法纯化成纤维 细胞。通过细胞形态观察、生长曲线测定和免疫荧光反应对细胞类型进行鉴定。结果表明, 采用胰酶消化法分离培养30 h后细胞开始生长,采用组织块贴壁培养法的细胞培养72 h后开 始从组织块边缘贴壁延伸生长;通过显微镜观察贴壁细胞呈梭型,连接紧密。对组织贴壁培 养法获得的细胞传代后状态良好呈纺锤形,细胞培养48~84 h后快速生长,84 h后生长变缓;免 疫荧光染色结果显示,波性蛋白染色为阳性,细胞核经DAPI染色呈现椭圆形,鉴定为成纤维 细胞。成纤维细胞微丝在细胞周边及内部均丰富分布。研究表明,利用组织块贴壁培养法及 胰酶消化法均能成功分离成纤维细胞,为后期深入研究嗉囊成纤维细胞功能奠定基础。

关键词: 鸽;嗉囊;成纤维细胞;组织块贴壁培养法;胰酶消化法

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