中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (8): 22-30.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.08.004

• 临床兽医 • 上一篇    下一篇

叶酸剥夺对鸡原代肝细胞脂代谢的影响

孙 喜1,理 云1,王强刚1,高思祺1,杨 景2,杨小军1,刘艳利1*   

  1. (1.西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌 712100; 2.陕西华秦农牧科技有限公司,陕西杨凌 712100)
  • 出版日期:2024-08-15 发布日期:2024-08-19
  • 作者简介:孙喜(2000-),女,硕士研究生,研究方向为动物营养与饲料科学,E-mail:sunxi_@nwafu.edu.cn

  • Online:2024-08-15 Published:2024-08-19

摘要: 研究旨在利用蛋白组和代谢组技术探究叶酸剥夺对鸡原代肝细胞脂代谢的影 响。试验将分离培养的鸡原代肝细胞分为对照组和叶酸剥夺组,每组 6 个重复,处理时间为 12 h,通过 RT-qPCR、MTT、ELISA 等探究鸡原代肝细胞脂质代谢、抗氧化、叶酸转运与代谢基 因表达、DNA 甲基化的变化。结果显示:叶酸剥夺后,细胞内总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG) 水平显著升高(P<0.05);肝细胞还原型叶酸载体(RFC)mRNA表达量显著降低(P<0.05),叶酸 受体(FR)mRNA 表达量也呈现下降趋势(P=0.064);成脂相关基因:脂肪酸合成酶(FAS)和胆 固醇调节元件结合蛋白(SREBP)mRNA 表达量显著降低(P<0.05),乙酰辅酶 A羧化酶(ACC) mRNA 表达量也呈下降趋势(P=0.071),但与β-氧化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体α (PPARα)和肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)mRNA表达量无显著差异(P>0.05);胰岛素/IGF通路 相关因子:胰岛素样生长因子2(IGF2)和胰岛素受体(INSR)mRNA表达量显著下调(P<0.05),苏 氨酸激酶 2(AKT2) mRNA 表达量显著升高(P<0.05);与 DNA 甲基化相关的 S-腺苷甲硫氨酸 (SAM)和DNA甲基转移酶1(DNMT1) mRNA丰度显著下调(P<0.05)。蛋白组京都基因和基因 组百科全书(KEGG)富集分析显示,与脂代谢相关的肌醇磷酸盐代谢、铁死亡、Apelin信号通路 等通路发生显著变化(P<0.05);代谢组数据显示,与糖脂代谢密切相关的糖酵解或糖异生、丙 酮酸盐代谢、三羧酸循环显著富集(P<0.05)。综上所述,叶酸剥夺通过降低DNMT1的表达进 一步导致甲基供体SAM水平降低以及PI3K/AKT通路的激活引起肝细胞中脂质沉积的增加。

关键词: 叶酸剥夺;鸡原代肝细胞;脂代谢;蛋白质组;代谢组

中图分类号: