摘要： 为建立一种快速、灵敏的检测我国优势基因型（L型）滑液囊支原体（MS）的方法，试 验针对L型MS vlhA 基因核苷酸序列保守区设计引物及TaqMan-MGB探针，将PCR扩增的vlhA 基因克隆至pMD19-T载体，构建重组质粒vlhA-L作为阳性质粒标准品，建立实时荧光定量PCR （qPCR）方法，并检验该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示：该方法特异性良好，与C型 MS-H株及其他鸡常见病原不发生交叉反应；重组质粒vlhA-L最小检出浓度为1.94×101 copies/μL； 组内和组间重复性变异系数均小于1%；临床样品检测结果与PCR测序结果吻合。研究表明，建 立的qPCR方法特异性强、灵敏性高、重复性好，适用于检测我国L型MS感染情况，还可满足监测 免疫MS-H株疫苗鸡群L型MS感染的要求。

关键词: 滑液囊支原体；vlhA基因；L型；TaqMan-MGB探针；实时荧光定量PCR

中图分类号: 

• S855.1