摘要： 研究旨在构建鸡Visfatin 基因的真核表达载体，并在LMH 细胞中过表达，揭示 LMH中Visfatin对脂类代谢相关基因的影响。试验采用RT-PCR扩增鸡Visfatin的编码区片 段，构建鸡Visfatin 基因的真核表达载体，转染LMH细胞后经Western blot对表达产物鉴定，用 荧光定量PCR检测LMH细胞中过表达Visfatin 基因对脂类代谢相关基因影响，检测不同组织 Visfatin 基因的表达情况。结果显示：扩增到的鸡Visfatin 基因CDS全长1 479 bp，其编码493个 氨基酸，鸡Visfatin蛋白的化学式为C2513H3912N656O751S8，分子量为55 587.13 u，其理论等电点（pI）为 6.66，根据稳定性的相关参数分析，该蛋白的不稳定系数小于40，表明Visfatin蛋白是一种相对 稳定的蛋白质，鸡Visfatin蛋白的脂肪指数为84.58，总平均亲水性为-0.455，提示其具有一定的 亲水性；构建的pCMV-3Tag-9-gga-Visfatin 真核表达载体在LMH细胞成功表达出Visfatin-Myc 融合蛋白，Visfatin 基因过表达后极显著下调LPL 和NMRK1 基因表达；鸡12种组织中的Visfatin 基因在胸肌组织中表达量较高。研究结果表明，Visfatin 基因通过下调LPL 和NMRK1 基因表达 对脂类代谢进行调控。

关键词: 鸡；Visfatin基因；LMH细胞；LPL基因；NMRK1基因

中图分类号: 

• S831.2