摘要： 试验旨在验证番鸭就巢相关miRNA与靶基因靶向关系。试验利用miRanda、PITA和 RNAhybrid 三个软件的交集预测 miR-317和 miR-244靶基因，构建 VIPR1-pmirGLO/MAP3K7- pmirGLO 野生型和突变型双荧光素酶重组载体，将 miR-317/VIPR1-Wt 和 miR-244/MAP3K7- Wt 分别共转染至鸭胚成纤维细胞，检测双荧光素酶活性。结果显示：与miR-NC组相比，miR- 317/VIPR1-Wt共转染组相对荧光值显著降低（P<0.05）；VIPR1突变后，miR-NC 组与 miR-317 组的相对荧光值不显著（P>0.05），说明突变后完全抑制 miR-317对 VIPR1的结合作用，VIPR1 与miR-317之间存在相互结合作用。与miR-NC组相比，miR-244/MAP3K7-Wt共转染组相对 荧光值无显著性差异（P>0.05）；MAP3K7突变后，miR-NC 组与 miR-244组的相对荧光值差异 不显著（P>0.05），表明MAP3K7与miR-244 之间不存在相互结合作用。研究提示，miR-317与 VIPR1存在确切靶向结合位点，即 VIPR1是 miRNA miR-317的靶基因，而 miR-244与 MAP3K7 不存在靶向关系。

关键词: 番鸭；就巢；miR-317；miR-244；MAP3K7；VIPR1

中图分类号: 

• S834.2