摘要： 为探究 J 亚群禽白血病病毒（Avian leukosis virus subgroup J，ALV-J）对鸡脾脏巨 噬细胞天然免疫反应的影响，试验利用密度梯度离心法和贴壁法，从鸡脾脏组织中分离得到 单核细胞，并通过显微镜观察培养至 24 h、72 h、120 h 单核细胞的分化过程；通过 PCR 扩增 ALV-J 特异性引物 H5/H7，验证脾脏巨噬细胞对 ALV-J 的易感情况；同时，通过 qPCR 验证感 染 ALV-J后鸡原代脾脏巨噬细胞中炎性因子、干扰素及肿瘤抑制因子的表达。结果显示：单 核细胞分化至第 120 h形成形态正常的巨噬细胞，通过流式细胞技术检测鸡巨噬细胞表面特 异性标记蛋白发现，84.9%的细胞为KUL01阳性细胞；鸡原代脾脏巨噬细胞对ALV-J易感，并且 ALV-J可整合进鸡原代脾脏巨噬细胞基因组中；对感染ALV-J的鸡脾脏巨噬细胞进行形态观 察，发现ALV-J感染导致鸡脾脏巨噬细胞形态逐渐萎缩直至死亡；ALV-J感染6 h、12 h、24 h及 48 h可诱导鸡原代脾脏巨噬细胞炎性因子（IL-1β、IL-6）的表达显著上调，在ALV-J感染24 h、 48 h诱导肿瘤抑制因子（TNF-α）的表达显著上调（P<0.05）；并且在早期（感染3 h）诱导干扰素 （IFN-β）及干扰素刺激基因（CH25H、STAT1、PKR）表达，后期（感染48 h）抑制部分干扰素刺激基 因（OAS、STAT1、ZAP、Mx、PKR）的表达。研究表明ALV-J感染鸡原代脾脏巨噬细胞早期可诱发 强烈的天然免疫反应，后期可能通过抑制IFN-β及部分干扰素刺激基因的表达实现免疫逃逸。

关键词: 鸡；鸡原代脾脏巨噬细胞；ALV-J感染；天然免疫因子

中图分类号: 

• S855.3