中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (2): 119-124.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.02.017

• 研究简报 • 上一篇    

龙胜凤鸡IGF2BP1基因的克隆、序列分析和 过表达载体构建

李现超1,杨祝良1,孙甜甜1,杨雪琴1,张佳仪1,黄 超2,粟永春2,杨秀荣1*   

  1. (1.广西大学动物科学技术学院,广西南宁 530004; 2.广西金陵农牧集团有限公司,广西南宁 530028)
  • 出版日期:2024-02-15 发布日期:2024-02-22
  • 作者简介:李现超(1995-),男,硕士研究生,研究方向为家禽遗传育种,E-mail:726640135@qq.com

  • Online:2024-02-15 Published:2024-02-22

摘要: 为研究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(Insulin-like growth factor 2 mRNAbinding protein 1,IGF2BP1)基因的序列和在鸡肌肉发育中的功能,研究克隆 IGF2BP1 基因并 进行生物信息学分析,构建 IGF2BP1的过表达载体 pEGFP-IGF2BP1,在成肌细胞验证载体的 功能。结果显示:龙胜凤鸡IGF2BP1基因CDS区序列全长1 731 bp,编码576个氨基酸,与参考 序列相比,存在 6处同义突变;物种间同源性分析显示,龙胜凤鸡 IGF2BP1基因与原鸡(Gallus gallus)、火鸡(Meleagris gallopavo)、绿头鸭(Anas platyrhynchos)、猪(Sus scrofa)、奶牛(Bos taurus)、 小鼠(Mus musculus)的相似性分别为 99.7%、94.7%、92.5%、82.4%、82.8%、82.7%;蛋白质二级、 三级结构主要含有无规卷曲(45.83%)、α 螺旋(27.26%)和延伸链(20.83%);经过酶切和测序 鉴定显示,成功构建了 pEGFP-IGF2BP1 质粒,并且该质粒可在成肌细胞中表达绿色荧光, qRT-PCR 结果显示 IGF2BP1 在试验组(转染 pEGFP-IGF2BP1)的表达量极显著高于对照组 (转染pEGFP-N1)(P<0.01)。结果表明,成功克隆IGF2BP1基因,构建的IGF2BP1基因过表达 载体在成肌细胞中成功表达。

关键词: 龙胜凤鸡;IGF2BP1基因;生物信息学;过表达载体

中图分类号: