稳定表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的293T细胞株构建及应用

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2023.10.009

中国家禽 ›› 2023, Vol. 45 ›› Issue (10): 59-64.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2023.10.009

稳定表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的293T细胞株构建及应用

曹永忠¹，邓婧^1,2，黄雅²，薄宗义¹，胡增垒^{1，2，3，4*}

（1.扬州大学，教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室，江苏扬州 225009；2.扬州大学，农业农村部畜禽传染病学重点开放实验室，江苏扬州 225009；3.扬州大学，江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州 225009；4.扬州大学，江苏省人兽共患病学重点实验室，江苏扬州 225009）

出版日期:2023-10-15 发布日期:2023-10-16
作者简介:曹永忠（1965-），男，博士，副研究员，主要从事动物疫病防控与生物信息学研究，E-mail: yzucao@yzu.edu.cn

Online:2023-10-15 Published:2023-10-16

摘要/Abstract

摘要： 为获得用于评价H7N9亚型禽流感疫苗诱导的抗体Fc免疫效应的靶细胞，研究采用慢病毒包装与感染技术构建一株稳定表达H7N9亚型禽流感病毒（H7N9 AIV）HA蛋白的细胞株，并以该细胞株为靶细胞建立H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清补体介导的细胞毒（ADCML）活性的检测方法。结果显示成功包装了一株重组慢病毒，滴度可达10⁸FU/mL；构建了稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的293T细胞株，HA蛋白主要在细胞膜上表达。基于新城疫病毒（NDV）载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡后，诱导产生的HA结合性IgG抗体滴度为2 180。以稳定细胞株为靶细胞，载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著高于空载体与未免疫鸡血清（P<0.001）；补体灭活后，载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著降低（P<0.001）。研究表明，基于NDV载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡血清具有较强的ADCML活性，稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的细胞株可作为评价H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清Fc免疫效应的靶细胞。

中图分类号:

S855.3

曹永忠，邓婧，黄雅，薄宗义，胡增垒. 稳定表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的293T细胞株构建及应用[J]. 中国家禽, 2023, 45(10): 59-64.

[1]	闫洪健，高启明，王一新，常爽，赵鹏，王成森. 不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白的免疫效果分析[J]. 中国家禽, 2023, 45(10): 50-58.
[2]	龙海川，张鹤平，苗立中，张文通，于新友，徐新蕊. Ⅰ群禽腺病毒的分离检测方法与疫苗研究进展[J]. 中国家禽, 2023, 45(10): 76-83.
[3]	相汝苹, 姚晓慧, 谢泉, 万志敏, 邵红霞, 秦爱建, 叶建强, 李拓凡. 鸡源EphrinA2基因的克隆表达及其单克隆抗体研制[J]. 中国家禽, 2023, 45(9): 25-30.
[4]	陈金南，陈睿，李尚泉，李静玲，陈容慧，农芳婷，王威威，李宜海，王林果，韦平，何秀苗. 传染性法氏囊病病毒和禽致病性大肠杆菌的二重探针实时荧光定量PCR方法的建立与应用[J]. 中国家禽, 2023, 45(9): 31-37.
[5]	曾熙雯，温贵兰，田兴舟. 禽白血病病毒与多种病原协同致病机理研究进展[J]. 中国家禽, 2023, 45(9): 74-81.
[6]	梁雄燕，余连喜，孙真真，万亮，陈雪阳，陈晶，方春，顾玉芳，杨玉莹. 鸭坦布苏病毒JZ1801株分离鉴定及其E蛋白序列分析[J]. 中国家禽, 2020, 42(10): 27-32.
[7]	李甜甜，王钜华，朱国强，钱钟，杨振，徐萍，魏荣荣，李琛，何存亚，范娟. 鹅星状病毒的分离鉴定及其致病性研究[J]. 中国家禽, 2020, 42(10): 116-120.
[8]	白晓，张诚，崔明仙，段晓军，常建光，陈立功，王学静，吕建国，刘聚祥. 肉鸡H5、H7亚型禽流感病毒母源抗体消长规律及其对禽流感疫苗接种的影响[J]. 中国家禽, 2019, 41(2): 65-66.
[9]	李素华，季佳，李钰萍，刘强，段博芳，代红炀，张文东，宋建领，郭爱伟，王雯慧，尹红斌. 基于NCBI数据库的禽源H5N2 AIV的HA基因进化分析[J]. 中国家禽, 2021, 43(2): 32-38.
[10]	邹桂莲，张文婷，赵宗正，王红琳，汪宏才，罗玲，张蓉蓉，张腾飞，罗青平，邵华斌，温国元，商雨，杨烨. 利用昆虫表达系统表达新城疫病毒TS09-C耐热株的HN蛋白胞外区[J]. 中国家禽, 2021, 43(2): 37-44.
[11]	赵蕾，史爱华，李林，张建伟，习硕，沈佳，姜北宇，彭湃，章振华. 鸡肝癌细胞系LMH培养特性的研究[J]. 中国家禽, 2021, 43(2): 116-120.
[12]	何倩，沈逵，秦爱建，钱琨. 禽白血病病毒衣壳蛋白P27慢病毒载体的构建及其在鸡肝癌细胞中的表达[J]. 中国家禽, 2021, 43(3): 16-21.
[13]	李敏，高延利，石梦雅，王威威，李海娟，李秋红，邓乔木，黄腾，韦平. 黄羽肉鸡马立克氏病病毒强毒株GX18NNM4的分离鉴定及其致瘤基因meq[J]. 中国家禽, 2021, 43(3): 28-34.
[14]	晏文俊，付雪，龚慧玲，倪瑞琪，王凯禄，李豪，雷昌伟，王红宁，杨鑫. 四种不同血清型IBV的多重PCR鉴定方法的建立[J]. 中国家禽, 2021, 43(4): 25-29.
[15]	沈佳，张建伟，李林，史爱华，郑小兰，姜北宇，章振华. 基于IBDV悬浮培养制备的ND-IB-IBD三联灭活疫苗免疫效力评估[J]. 中国家禽, 2021, 43(4): 30-35.

稳定表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的293T细胞株构建及应用

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价