中国家禽 ›› 2022, Vol. 44 ›› Issue (8): 35-41.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2022.08.006

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血清1型Ⅰ群禽腺病毒Fiber-2蛋白的表达及其中和作用研究

高永娟1,栾庆东2,曲雪婷2,原昆鹏2,王潘龙1,赵梓靓1,卢艳敬1,尹燕博1*,王建琳1*   

  1. (1.青岛农业大学动物医学院,山东青岛 266109; 2.青岛博隆基因工程有限公司,山东青岛 266021)
  • 发布日期:2022-08-19
  • 作者简介:高永娟(1995-),女,硕士研究生,研究方向为家禽传染病诊断,E-mail:740306196@qq.com

  • Published:2022-08-19

摘要: 为研究血清1型Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-1)的Fiber-2蛋白对FAdV-1在细胞水平上的中和作用,研究根据FAdV-1亚型Fiber-2基因序列设计引物,进行Fiber-2全基因序列PCR扩增并构建重组质粒,转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,表达产物纯化后免疫SPF鸡制备抗血清,通过鸡LMH细胞研究Fiber-2蛋白抗血清对FAdV-1感染的中和作用。结果显示,FAdV-1 Fiber-2基因扩增产物大小为1 233 bp,构建了pCold-FAdV-1-Fiber-2重组质粒,表达的 FAdV-1 Fiber-2 蛋白分子量大小为 105 ku;FAdV-1 Fiber-2 蛋白的抗血清孵育LMH细胞后,与阳性对照组相同第4天细胞出现病变,而阴性对照组细胞均无病变。结果表明,FAdV-1 Fiber-2蛋白抗血清在体外试验中不能中和本血清型病毒的感染,FAdV-1 Fiber-2蛋白作为亚单位疫苗的研究存在风险。

关键词: 血清1型Ⅰ群禽腺病毒;Fiber-2蛋白;LMH细胞;中和作用

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