摘要： ：为建立一种准确快速检测新型鹅星状病毒（Goose astrovirus，GAstV）的方法，研究 以GAstV毒株JS20为模板，根据GAstV的ORF2 基因序列设计特异性引物，在构建重组质粒 pGEMT-GAstV的基础上，建立了检测GAstV的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR（qRT-PCR） 方法。结果显示：阳性对照重组质粒pGEMT-GAstV在1.087×101~1.087×108拷贝/μL浓度之间 与qRT-PCR的Ct值呈现良好的线性关系；该qRT-PCR对所检测的鸡星状病毒（cASTV）、禽腺 病毒（FAdV）、小鹅瘟病毒（GPV）以及鸭坦布苏病毒（DTMUV）均无交叉反应；检测灵敏度为 1.087×101拷贝/μL，组内和组间变异系数均小于1.6%。利用该qRT-PCR方法对在鹅胚及LMH 细胞上繁殖不同代次的JS20病毒载量进行检测发现，JS20在鹅胚上的扩增效率更高，病毒载 量可达108~109拷贝/mL。对江苏不同地区26份临床样品进行检测发现，该qRT-PCR方法的阳 性检出率为73.08%，而普通PCR方法阳性检出率仅为42.30%。结果表明建立的新型GAstV qRT-PCR具有很好的特异性及灵敏度，且在新型GAstV定量分析及临床样品检测诊断中展示 了良好的应用前景。

关键词: 新型鹅星状病毒；荧光定量PCR；特异性；灵敏度；临床诊断

中图分类号: 

• S855.3