中国家禽 ›› 2022, Vol. 44 ›› Issue (10): 24-30.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2022.10.005

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禽偏肺病毒感染Vero细胞的外泌体蛋白质组学分析

王 丹1*,侯 磊2*,宋江伟1,王 菁1,全 荣1**,刘 爵2**   

  1. (1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京 100097;2.扬州大学兽医学院,江苏扬州 225009)
  • 发布日期:2022-10-14
  • 作者简介:王丹(1986-),女,博士,助理研究员,主要从事动物病毒病研究,E-mail:wangdananne@163.com;侯磊(1982-),男,博士,副教授,主要从事动物病毒病研究,E-mail:hlbj09@163.com

  • Published:2022-10-14

摘要: 为研究C型禽偏肺病毒(aMPV/C)感染Vero细胞后外泌体中蛋白质组分的变化,试验收集感染病毒后48 h的细胞培养液,用超速离心法分离外泌体。经透射电镜观察、纳米颗粒跟踪技术分析、蛋白质印迹法(Western blot)鉴定后,对外泌体进行示踪试验。利用非标记定量液相色谱-质谱联用(lable-free LC-MS/MS)技术和生物信息学方法分析外泌体的蛋白质组分。结果显示:分离的外泌体为杯状双层膜囊泡,具有特征性膜蛋白 CD63、CD81、Tsg101,能够进入未感染的Vero细胞;aMPV/C感染组中170个蛋白表达上调,11个蛋白表达下调;差异表达蛋白大多来源于细胞器和细胞膜,主要参与细胞过程、生物调节、代谢过程等生物学过程,执行受体结合、酶催化、分子调节等功能,集中于内吞作用、病毒感染、细胞衰老等通路。研究表明,aMPV/C感染使Vero细胞外泌体蛋白质组分发生明显变化,差异表达蛋白主要集中于细胞膜信号传导通路、病毒感染相关信号通路、细胞增殖相关信号通路,被aMPV/C感染的Vero细胞能以外泌体形式向未感染细胞进行物质或信息传递。

关键词: 禽偏肺病毒;Vero细胞;蛋白质组学

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