中国家禽 ›› 2021, Vol. 43 ›› Issue (7): 44-49.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2021.07.006

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Ⅱ型鸡星状病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的 表达以及多克隆抗体的制备

徐熙皓1,2,徐海银1,2,赵伟1,2,秦爱建1,2,3,钱琨1,2,3,4*   

  1. (1.扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室,江苏扬州225009; 2.扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室,江苏扬州225009; 3.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009; 4.扬州大学比较医学研究院,江苏扬州225009)
  • 发布日期:2021-07-12
  • 作者简介:徐熙皓(1999-),男,本科生,专业方向为动物微生物学,E-mail:2389903726@qq.com

  • Published:2021-07-12

摘要: 为构建Ⅱ型鸡星状病毒衣壳蛋白昆虫细胞表达载体,并免疫小鼠制备多克隆抗 体,研究根据病毒衣壳蛋白基因序列设计引物,采用RT-PCR扩增衣壳蛋白基因全长,亚克隆 至杆状病毒转移载体pFast-Bac-HTA,经过蓝白斑筛选获得重组杆状病毒质粒rBacmid-cap, 将鉴定正确的阳性质粒转染至昆虫Sf9细胞获得重组杆状病毒。Western-blot和间接免疫荧 光检测结果表明,Ⅱ型鸡星状病毒衣壳蛋白在昆虫Sf9细胞中成功表达,利用表达衣壳蛋白的 昆虫细胞免疫小鼠制备的多克隆抗体血清与天然病毒也具有良好的反应性。试验结果为进 一步研究鸡星状病毒衣壳蛋白的生物学功能以及病毒检测方法的建立提供了生物材料。

关键词: 重组杆状病毒;鸡星状病毒;衣壳蛋白;多克隆抗体

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