GST pull-down联合质谱分析技术筛选鸡NOS2的互作蛋白

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2020.09.003

中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (9): 19-25.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.09.003

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GST pull-down联合质谱分析技术筛选鸡NOS2的互作蛋白

周鑫琦¹，王颖洁^1，2，张文慧^1，2，张亚妮^1，2*

1.扬州大学动物科学技术学院，江苏扬州225009；2.江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室，江苏扬州225009

发布日期:2020-10-23
作者简介:周鑫琦（1998-），女，本科生，研究方向为动物胚胎工程与遗传工程，E-mail：1971802131@qq.com

Published:2020-10-23

摘要/Abstract

摘要： 为了筛选NOS2在鸡雄性生殖细胞形成过程中的互作蛋白，通过克隆NOS2序列，构建pGEX-6p-NOS2原核表达载体且诱导表达NOS2蛋白，采用GST pull-down联合质谱分析技术筛选与鸡NOS2相互作用的蛋白质。结果显示：经GST pull-down质谱分析鉴定到316个与鸡NOS2相互作用的候选蛋白质，其中12个高评分蛋白具有相同的功能注释，参与精子运动调控，且主要分布在细胞质、细胞核等细胞组分中，可能通过与其它蛋白质、核酸等分子结合而参与MAPK、Notch等信号通路；质谱分析还发现GOT1蛋白与NOS2互作最为明显，该蛋白参与Notch信号通路，后续将作为重点候选互作蛋白以探究其与NOS2蛋白的互作方式。该结果为进一步探究NOS2在鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化中的调控机制奠定了实验基础。

中图分类号:

S831.2

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