中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (7): 6-12.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.07.002

• 遗传育种 • 上一篇    

PPARα siRNA干扰对骡鸭原代肝细胞脂质 代谢基因表达影响研究

蓝立明1,潘晓丽1,何文峰1,白丁平1,张福君2,郑永干2,李 昂1*   

  1. (1.福建农林大学动物科学学院(蜂学学院),福建福州 350002; 2.吉林正方农牧股份有限公司,吉林梅河口 135000)
  • 发布日期:2021-12-02
  • 作者简介:蓝立明(1994-),男,硕士研究生,研究方向为动物遗传育种与繁殖,E-mail:1902808963@qq.com

  • Published:2021-12-02

摘要: 为揭示PPARα基因对骡鸭肝细胞PPAR信号通路中脂质代谢基因的调控作用,试 验以16日胚龄的骡鸭为材料,用Ⅳ型胶原酶法分离原代肝细胞,分离的原代肝细胞经形态学 观察、糖原染色和白蛋白(ALB)检测鉴定后用于后续试验;构建 4 对干扰 PPARα 基因的 siRNA,分别转染骡鸭原代肝细胞,转染12 h后用荧光显微镜检测转染效率,转染48 h后用油 红O染色检测肝细胞脂质分泌情况,筛选干扰效率最高的siRNA,qRT-PCR检测该siRNA干 扰PPARα基因后PPAR信号通路上脂质代谢相关基因的表达情况。结果显示:Ⅳ型胶原酶法 分离的骡鸭原代肝细胞活性较好,ALB的分泌量维持在较高水平,糖原染色发现大量细胞存 在双核和多核状态,干扰效率最高的PPARα-1344组与对照组相比脂质分泌量减少,原代肝细 胞中 LPL、FABP、FAS 和 ACBP 基因表达量极显著下调(P<0.01),SCD 基因表达量显著下调 (P<0.05),APO-A1、CYP7A1和CPT1基因表达量差异不显著(P>0.05)。研究表明:分离的骡鸭 原代肝细胞纯度好、活性高,PPARα基因可能促进脂肪在肝脏中沉积,与骡鸭的肥肝形成密切 相关。

关键词: 骡鸭;PPARα;原代肝细胞;脂质代谢

中图分类号: