中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (12): 30-35.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.12.006
赵伟1,2*,武宗仪1,2*,秦爱建1,2,3,钱琨1,2,3,4**
摘要: 研究旨在建立一种检测鸡Ⅱ型星状病毒(CAstV)绝对定量的检测方法。采用 PCR方法扩增Ⅱ型CAstV保守区域基因RdRp 部分基因,将其克隆至pGEM-T载体作为阳性标 准质粒,并根据获得的RdRp 基因设计合成一对133 bp引物,成功建立了Ⅱ型CAstV的绝对定 量real-time PCR的检测方法。结果显示:研究构建的检测方法线性关系良好,检测灵敏度为 10 copies/μL,且对常见的禽源病毒均无非特异性扩增,特异性好。应用建立的绝对定量real-time PCR检测了病毒感染1日龄雏鸡不同组织样品,掌握了鸡Ⅱ型星状病毒在鸡体内不同组织内 的分布及增殖情况。试验成功建立了Ⅱ型CAstV绝对定量real-time PCR检测方法,该方法 特异性强、灵敏度高、重复性好,为进一步深入研究Ⅱ型CAstV的生物学特性提供了检测手段。
中图分类号: