摘要: 为构建禽网状内皮组织增生症病毒(REV)MD-2株的感染性克隆,将MD-2株的前病 毒基因组全长克隆至pMD18-T Simple载体中构建MD-2全长质粒,经转染CEF细胞后进行病 毒拯救及鉴定,并对拯救病毒进行了生物学特性研究。结果表明,成功构建了MD-2全长质 粒,拯救病毒感染CEF细胞后用间接免疫荧光试验检测到病毒抗原;拯救病毒的生长特性与亲 本病毒相比无明显差异。随后对env基因进行了多个位点的定点突变,并拯救出相应的突变株, 结果显示env基因第1433位碱基突变后不能拯救出病毒,推断1433位的突变为致死性突变。 MD-2株感染性克隆的构建和病毒拯救的研究为继续研究REV基因和蛋白功能提供了技术支持。
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