摘要: 研究旨在建立一种快速检测圆圈病毒人源 1 型(GyH1)的方法。试验通过比对 GenBank中GyH1基因组序列,基于序列保守区设计特异性引物和探针,经过筛选和优化,建立 GyH1实时荧光重组酶介导核酸等温扩增(RAA)检测方法。结果显示:建立的实时荧光 RAA 方法可在20 min内鉴定GyH1;该方法特异性强,与圆圈病毒禽源1型(GyVg1)、鸡传染性贫血 病毒(CIAV)、血清 4 型禽腺病毒(FAdV-4)、H9 亚型禽流感病毒(H9 AIV)、新城疫病毒 (NDV)、禽传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡细小病毒(ChPV)、J亚 群禽白血病病毒(ALV-J)、鸡毒支原体(MG)、禽滑液囊支原体(MS)无交叉反应;敏感性高,筛 出的引物探针可有效扩增,优化反应条件后检测限可达102 拷贝/μL;重复性好,批内和批间变 异系数均小于4%。采用该方法与荧光定量PCR方法同时对231份样品进行检测,两者检测结 果相符。研究表明,成功建立了实时荧光RAA方法,可用于GyH1的鉴别检测,为基层快速检 测GyH1提供了新的技术手段。
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