摘要: 为建立一种简便、快速的鸡传染性贫血病毒(CIAV)检测方法,试验针对 CIAV VP2基因序列设计了多组引物和探针,经过引物筛选及反应温度和时间的优化,建立了 CIAV 的实时荧光重组酶聚合酶扩增方法(RPA),并对该方法的特异性、敏感性及重复性进行评 估,应用该方法与荧光定量PCR(qPCR)同时对50份临床样品进行检测,比较两种方法的符合 率。结果显示:该方法可在39 ℃恒温条件下20 min内快速、准确地检出CIAV,与其他6种常见 的禽类病原体如传染性法氏囊病病毒(IBDV)、马立克病病毒(MDV)、J 亚群禽白血病病毒 (ALV-J)、新城疫病毒(NDV)、禽传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)不 存在交叉反应;该方法对质粒 DNA 的检测限为 1×102 copies/μL;该方法检测 50份临床样品中 有9份阳性,与qPCR的检测结果一致。研究表明:建立的检测CIAV的RPA操作简单、反应灵 敏、特异性高、检测结果可靠,可用于鸡传染性贫血的快速检测和流行病学调查。
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