中国家禽 ›› 2025, Vol. 47 ›› Issue (2): 27-33.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2025.02.004

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腺病毒载体介导编辑chNHE1基因 对J亚群禽白血病病毒抗性研究

王 震1,陈运通2,魏天悦2,3,陈洪岩2,3,王旭光1*,高玉龙2*,夏长友2,3*,孟庆文2,3*   

  1. (1.新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐 830052; 2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,动物疫病防控全国重点实验室,黑龙江哈尔滨 150069; 3.黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室, 国家禽类实验动物资源库,黑龙江哈尔滨 150069)
  • 出版日期:2025-02-15 发布日期:2025-02-13
  • 作者简介:王震(1998-),男,硕士研究生,研究方向为动物遗传育种与繁殖,E-mail:wangzhen156324@163.com

  • Online:2025-02-15 Published:2025-02-13

摘要: 鸡Na+/H+离子交换蛋白-1(chNHE1)是J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的细胞受体, 是 ALV-J 感染的细胞靶点。为了探索鸡抗禽白血病的育种目标,试验构建了定点编辑 chNHE1基因的CRISPR/Cas9腺病毒系统,并对编辑后细胞抗ALV-J感染能力进行评价。结果 显示:使用CRISPR/Cas9腺病毒载体介导的ssODNs同源重组方案可以在chNHE1中引入突变, 其中36%单克隆细胞株存在W38缺失;T37缺失的细胞对ALV-J感染具备极显著的抗性;W38 缺失的细胞对 ALV-J 感染具有完全抗性,同时具有 E35A 替换、P36 缺失、T37 缺失的细胞对 ALV-J感染也具有完全抗性。研究表明,CRISPR/Cas9腺病毒载体可以有效地编辑鸡DF-1细 胞,W38缺失或E35A替换P36、T37缺失都可以使DF-1对ALV-J感染具有抗性,该方案为培育抗 ALV-J感染的基因编辑鸡提供技术储备。

关键词: J亚群禽白血病病毒;鸡Na+ /H+ 交换蛋白-1;腺病毒载体;CRISPR/Cas9

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