摘要: 研究旨在探究差异代谢物泛酸(PA)对鸡胚胎干细胞(ESCs)向原始生殖细胞 (PGCs)分化过程中的作用,为从代谢角度解析 PGCs形成机制提供新的理论基础。试验基于 转录组学筛选出 PA,通过 CCK8 与 EdU 试验探究 PA 及其代谢抑制剂 PZ 的适宜添加浓度;最 后,分别通过观察细胞形态、qRT-PCR 检测 PGCs特异标记基因、间接免疫荧光和流式细胞分 析等分析 PA代谢在 ESCs向 PGCs分化过程中的作用。结果显示:参与 PA代谢相关的基因在 ESCs 与 PGCs 中呈现差异性表达,且富集于生殖细胞分化相关的通路(Pantothenate and CoA biosynthesis、TGF-beta signaling pathway 和 AMPK signaling pathway);PA 和 PZ的适宜添加浓度 分别为 20 μmol/L 和 80 nmol/L;PA 组在第 6 天的类胚体数目显著低于 PZ 组,PA 组中 CVH 和 C-KIT3的表达量显著低于PZ组(P<0.01);PA组的DDX4阳性细胞数显著低于PZ组(P<0.01)。 结果表明添加PA抑制PGCs的形成,添加PZ促进PGCs的形成。
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