摘要： 为制备H9N2亚型禽流感病毒（AIV）多拷贝M2e蛋白单克隆抗体，试验将纯化的3M2e 重组蛋白免疫BALB/c小鼠；取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合，采用间接ELISA筛选出分泌 抗体的杂交瘤细胞株；将获得的杂交瘤细胞株腹腔注射BALB/c小鼠制备腹水；采用间接ELISA测 定腹水效价，鼠源单克隆抗体亚类鉴定试剂盒检测单克隆抗体腹水，三株单克隆抗体重链亚型均 为IgG1；Western blot鉴定单克隆抗体的特异性；使用IFA鉴定3M2e蛋白在Sf9细胞的表达和检测 H9N2亚型AIV在MDCK细胞的感染。结果显示：获得了3株分泌多拷贝M2e抗体的杂交瘤细胞 株，分别命名为4C7-B11、4E10-A10和5A12-B5；获得腹水的效价均为1∶1 000 000；三株单克隆抗 体重链亚型均为IgG1；Western blot 鉴定三株单克隆抗体均能与2M2e、3M2e和4M2e原核重组蛋白 及在Sf9细胞表达的3M2e发生特异性反应；IFA鉴定结果也显示三株单克隆抗体均能检测3M2e蛋 白在Sf9细胞的表达，并且能检测到H9N2亚型AIV在MDCK细胞上的感染，出现特异性的绿色荧 光；三株单克隆抗体重链亚型均为IgG1。研究获得了H9N2亚型AIV多拷贝M2e单克隆抗体，可用 于Western blot和IFA鉴定，为靶向M2e蛋白H9N2亚型禽流感疫苗的研究提供特异性的检测工具。

关键词: 禽流感病毒；M2e蛋白；蛋白表达；单克隆抗体

中图分类号: 

• S852.65