H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2024.11.006

中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (11): 40-44.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.11.006

H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定

张洁^1，2，崔鹏飞²，张元成²，邢鑫²，王丛丛²，颜成²，王燕²，陈源²，朱春成¹，缪葭皓²，陈素娟¹，邓国华^2*，陈化兰²

（1.扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009； 2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，动物疫病防控全国重点实验室，国家禽类实验动物资源库，黑龙江哈尔滨 150069）

出版日期:2024-11-15 发布日期:2024-11-15
作者简介:张洁（1999-），女，硕士研究生，研究方向为禽流感病毒分子流行病学，E-mail：zhangjie19991130@163.com

Online:2024-11-15 Published:2024-11-15

摘要/Abstract

摘要： 研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备H5N1亚型禽流感病毒（AIV）的神经氨酸酶（NA）蛋白。试验为获得具有良好反应原性的 NA 蛋白，将 H5N1 亚型 AIV（DK/YN/ S4469/2022）密码子优化后的 N1基因插入载体 pFastBac1，构建的重组转移载体 pFastBac1-N1 转化至DH10Bac感受态细胞，经过蓝白斑筛选获得阳性重组杆粒rBacmid-N1，然后将重组杆粒转染至sf9昆虫细胞，获得N1亚型重组杆状病毒。结果显示：N1重组蛋白在sf9昆虫细胞中正确表达，并且该重组蛋白具有良好的反应原性，能够与N1蛋白单克隆抗体3F3发生特异性反应，其仅能识别N1亚型鸡血清，特异性较好。研究成功制备了N1重组蛋白，为NA蛋白表达方法提供参考并为临床血清样品的N1抗体检测方法的建立奠定基础。

中图分类号:

S852.65

张洁，崔鹏飞，张元成，邢鑫，王丛丛，颜成，王燕，陈源，朱春成，缪葭皓，陈素娟，邓国华，陈化兰. H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定[J]. 中国家禽, 2024, 46(11): 40-44.

[1]	张民秀，谢芝勋，李　孟，罗思思，谢志勤，谢丽基，李丹，阮志华. H9N2亚型禽流感病毒多拷贝M2e蛋白单克隆抗体的制备[J]. 中国家禽, 2024, 46(11): 45-51.
[2]	高楚泽，刘郑煜，刘金华，黄银花. 鸭AvBD3C抗H5N1亚型禽流感病毒活性研究[J]. 中国家禽, 2024, 46(11): 52-58.
[3]	陈源，崔鹏飞，施建忠，邓国华，陈化兰. 5株H6N3亚型禽流感病毒的分子特征及遗传演化分析[J]. 中国家禽, 2024, 46(11): 70-77.
[4]	张盼涛，朱巧艳，王勋，王莹，高艳艳，高彬文，张贺伟. 新型H3N8亚型禽流感病毒SQ03株的分离鉴定与免疫原性评价[J]. 中国家禽, 2024, 46(11): 78-86.
[5]	佟琪，韩琪祺，束思成，常昊宇，刘金华，孙洪磊. 水禽源H3亚型禽流感病毒分离鉴定及其对鸭的致病性研究[J]. 中国家禽, 2024, 46(11): 87-94.
[6]	赵学楠，熊俊龙，周江涛，崔芸绮，张家，亓文宝. 2株2023年禽源H7N9亚型禽流感病毒的分离鉴定及遗传进化分析[J]. 中国家禽, 2024, 46(11): 95-105.
[7]	董建国，麻冰洁，王瑞，芦一丹，杨海倩，杨大苗，梁自怡，王念念，饶丹，焦凤超，张宁，何书海. 一株新型鹅星状病毒HNxy2111株全基因组测序分析[J]. 中国家禽, 2024, 46(10): 173-178.
[8]	禚振男，孔令明，王子静，郭平，曲昌宝，刘丹丹，钱晨，陶建平，许金俊. 黄羽肉鸡感染火鸡组织滴虫后血清生化指标的动态变化[J]. 中国家禽, 2020, 42(8): 30-34.
[9]	管飘萍，Enkhbayar Munkhbayar，黄紫贝，陈诗涵，郭鑫，王海燕，刘文博. 22株鸭甲型肝炎病毒的分离鉴定及其VP1基因的序列分析[J]. 中国家禽, 2021, 43(1): 105-109.
[10]	亓玉卓，梁琳，朱亚丽，梁瑞英，贾亚雄，单虎，崔尚金. 鸽圆环病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法的建立及应用[J]. 中国家禽, 2021, 43(3): 22-27.
[11]	金元昌，张幽静，曹清国，曾钢，郝美林. 鸡马立克氏病肿瘤相关非编码RNA表观遗传调控的研究进展[J]. 中国家禽, 2021, 43(8): 1-7.
[12]	张冰莎，磨美兰. 鸡传染性支气管炎病毒抗原表位研究进展[J]. 中国家禽, 2021, 43(9): 91-97.
[13]	陈济铛，陈冈，牛森，朱婉君，张溢珊，刘敏芳，陈建红，张济培. 广东鹅源圆环病毒分子流行病学调查与毒株遗传进化分析[J]. 中国家禽, 2020, 42(4): 97-102.
[14]	范春艳，汪秀会，宋金祥，薛素琴，孙惠霞，唐争魁，马兴树，乔健. 2株鹌鹑源H9N2亚型禽流感病毒HA基因序列分析[J]. 中国家禽, 2020, 42(2): 26-31.
[15]	栾璐，倪小舒，刁小龙，刘云迎，印广浩，何海蓉. 3株H9N2亚型重组禽流感病毒生物学特性及免疫原性研究[J]. 中国家禽, 2022, 44(3): 38-43.

H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价