中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (10): 81-88.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.10.010
翁 贝1,2,崔洲昊1,2,邵红霞1,2,3,秦爱建1,2,3,钱 琨1,2,3*
摘要: 为制备针对家禽糖原合成酶激酶 3β(GSK-3β)的单克隆抗体以及了解不同细胞 中GSK-3β蛋白的基础表达量,试验利用原核表达纯化的GSK-3β蛋白免疫BALB/c小鼠,真核 表达 GSK-3β蛋白间接免疫荧光筛选杂交瘤阳性细胞,并利用单克隆抗体检测不同禽源细胞 (LMH细胞、DF-1细胞、CEF细胞)中GSK-3β蛋白表达情况。结果显示:共获得3株单克隆抗 体细胞株,分别命名为4C1、5B11和8G9,其中4C1和5B11仅能结合禽源细胞中的GSK-3β,而 8G9和禽源以及人源的GSK-3β都能反应;单克隆抗体4C1介导的Western bolt显示在LMH细 胞中GSK-3β蛋白丰度相对最高,而RT-qPCR显示其中LMH细胞中GSK-3β基因转录水平较 低。研究成功制备了禽源 GSK-3β 的单克隆抗体,为深入研究家禽 GSK-3β 的生物学功能提 供良好的生物材料。
中图分类号: