摘要： 为建立特异的血清4型禽腺病毒（FAdV-4）血清学抗体检测技术，试验将FAdV-4 纤突蛋白基因fiber-2克隆至载体pET-28a中，构建原核表达载体pET-28a-Fiber-2，获得纯化的 重组蛋白His-Fiber-2，以纯化的His-Fiber-2作为包被抗原建立检测Fiber-2抗体的间接ELISA 方法，对该方法进行特异性、重复性、稳定性、灵敏性试验，并与BioChek FAdV商品化ELISA试 剂盒检测结果进行比较。结果显示：建立的ELISA仅与抗FAdV-4阳性鸡血清发生反应，与 检测的抗其他病原的血清以及SPF鸡血清均无反应性，批间重复性与批内重复性良好，其变 异系数分别在4.345%~6.983%和4.326%~9.391%之间，包被酶标板保存12个月后，变异系数为 4.4%~10.0%，其检测灵敏度是间接免疫荧光检测技术的8~32倍，是基于包被GST-Fiber-2蛋 白ELISA的2倍；建立的ELISA对FAdV-4灭活疫苗免疫的鸡血清检出率高于BioChek试剂盒， 两者对临床感染FAdV-4的鸡血清的检测结果一致。研究表明，试验构建的基于重组蛋白 His-Fiber-2的检测FAdV-4抗体的间接ELISA方法为临床上FAdV-4感染监测以及疫苗的免 疫评价提供了技术，具有良好的应用前景。

关键词: 血清4型禽腺病毒；原核表达；间接ELISA；抗体检测

中图分类号: 

• S855.3