中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (1): 30-37.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.01.005

• 遗传育种 • 上一篇    下一篇

鸡皮肤组织的冷冻保存以及复苏后成纤维细胞的培养

高嘉晨1,2*,邹艺琛1,2*,周 静1,2,赵娟娟1,2,徐显帅1,2,薛 倩3,韩 威3,李碧春周 静1,2,靳 锴1,2**   

  1. (1.扬州大学动物科学与技术学院,江苏省动物育种繁殖与分子设计重点实验室,江苏扬州 225009;2.扬州大学,农业科技发展研究院国际联合实验室,江苏扬州 225009;3.江苏省家禽科学研究所,江苏扬州 225125)
  • 出版日期:2024-01-15 发布日期:2024-01-25
  • 作者简介:高嘉晨(1996-),男,硕士研究生,研究方向为动物遗传育种,E-mail:2922953626@qq.com

  • Online:2024-01-15 Published:2024-01-25

摘要: 试验旨在探究程序化低温保存时两种渗透性冷冻保护剂对鸡皮肤组织保存的影响。从孵化 9 d 的鸡胚中分离皮肤组织,剪碎为 1 mm3大小的组织块,对组织块冷冻保存后复苏培养并统计复苏率,通过 CCK8试验、EDU 试验检测冻存复苏后细胞的增殖能力、PI染色检测细胞周期分布、JC-1检测线粒体膜电位检测,qRT-PCR 检测标记基因的差异表达。结果显示:使用 15%二甲基亚砜和 20%甘油冻存的组织块复苏效率分别为(95.8±1.4)%和(92.5±2.5)%,显著高于其他冷冻保护剂组合(P<0.05)。CCK8和EDU试验中,15%的二甲基亚砜和20%甘油冻融组织块培养的细胞与对照组相比细胞增殖速度无显著差异(P>0.05);与对照组相比,15%二甲基亚砜和20%甘油冻融组织块培养的成纤维细胞G1、G2、S期都未有显著差异(P>0.05);线粒体膜电位检测显示20%甘油保存的组织块培养的成纤维细胞其膜电位与对照组相比出现了显著下降(P<0.05),15%二甲基亚砜和20%甘油冻融组织块培养的成纤维细胞标记基因的表达水平与对照组相比无显著差异(P>0.05)。结果表明,15%二甲基亚砜和20%甘油冻存的鸡皮肤组织块复苏效率无显著差异,但是15%二甲基亚砜的冻存效果要优于20%甘油。

关键词: 冷冻保存;鸡皮肤组织;细胞增殖

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