中国家禽 ›› 2023, Vol. 45 ›› Issue (10): 50-58.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2023.10.008

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不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白的免疫效果分析

闫洪健1,高启明1,王一新1,常 爽1,赵 鹏1*,王成森2*   

  1. (1.山东农业大学动物科技学院(动物医学院),山东泰安 271018;2.山东畜牧兽医职业学院,山东潍坊 261000)
  • 出版日期:2023-10-15 发布日期:2023-10-16
  • 作者简介:闫洪健(1998-),男,硕士研究生,研究方向为动物分子病毒学与家禽肿瘤病,E-mail:yanhongjian1998@163.com

  • Online:2023-10-15 Published:2023-10-16

摘要: 为研究不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒(aHEV)ORF2蛋白的免疫效果影响,研究通过大肠杆菌原核表达系统表达aHEV ORF2蛋白,纯化后与弗氏佐剂按1∶1等体积混合制备亚单位疫苗。将90只1日龄SPF雏鸡随机分成6组,每组15只。ORF2蛋白组单纯免疫YT-ORF2蛋白,ORF2蛋白+弗氏佐剂组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂,AB101组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB101,AB106组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB106,AB506组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB506,空白对照组免疫生理盐水,分别在 21、28、42 日龄三次免疫 SPF 鸡。采用ELISA和间接免疫荧光检测不同免疫组SPF鸡的aHEV抗体水平,通过流式细胞仪检测CD4+和CD8+ T淋巴细胞水平,荧光定量PCR检测IL-2、IL-4、IFN-γ 3种细胞因子表达情况,并测定体重和器官发育指数。结果显示:原核表达获得分子量为72 ku的ORF2蛋白,AB106组产生的抗体水平极显著高于其他各组(P<0.01),AB106 和 AB506 免疫增强剂可引起 CD4+和CD8+ T细胞比重显著增加并上调IL-2、IL-4、IFN-γ表达量(P<0.05),AB106组脾脏指数、法氏囊指数显著高于空白对照组、ORF2蛋白组和ORF2蛋白+弗氏佐剂组(P<0.05)。研究表明含胸腺肽和TLR7激动剂的免疫增强剂可显著提高CD4+和CD8+ T细胞比重并上调与免疫相关的细胞因子表达量,其中且含胸腺肽的免疫增强剂诱导的aHEV抗体水平较高。

关键词: 禽戊型肝炎病毒;免疫增强剂;ORF2;亚单位疫苗;原核表达

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