基于沙门氏菌PagN外膜蛋白的广谱单克隆抗体的制备与鉴定

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2023.04.012

中国家禽 ›› 2023, Vol. 45 ›› Issue (4): 69-75.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2023.04.012

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基于沙门氏菌PagN外膜蛋白的广谱单克隆抗体的制备与鉴定

孟闯^1，2，3，丁睿清^1，3，尚月月^1，3，刘钧^1，3，徐双媛^1，3，康喜龙^1，2，3，焦新安^1，2，3*，潘志明^1，2，3*

（1.扬州大学，江苏省人兽共患病学重点实验室，江苏扬州 225009；2.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州 225009；3.扬州大学，农业农村部农产品质量安全生物性危害因子（动物源）控制重点实验室，江苏扬州 225009）

发布日期:2023-04-14
作者简介:孟闯（1985-），男，博士，讲师，主要从事沙门氏菌防控新技术研究，E-mail：mengchuang@yzu.edu.cn

Published:2023-04-14

摘要/Abstract

摘要： 为制备针对沙门氏菌特异性外膜蛋白PagN的单克隆抗体（MAb），研究通过构建重组质粒pColdⅠ-pagN和pGEX-6P-1-pagN，利用大肠杆菌系统表达并纯化了肠炎沙门氏菌His-PagN和GST-PagN重组蛋白，免疫6~8周龄BALB/c小鼠，利用B淋巴细胞杂交瘤技术筛选获得2株能稳定分泌PagN蛋白MAb的杂交瘤细胞株3B3和3F10。结果显示：3B3和3F10的亚型均为IgG2b，ELISA效价分别为1.14×10⁹和1.32×10⁸，Western blot分析显示其均能特异性结合His-PagN蛋白；进一步分析显示3B3和3F10可特异性识别9种不同血清型沙门氏菌，而不与9种非沙门氏菌菌株反应；全菌包板间接ELISA结果显示3F10能特异性识别不同血清型沙门氏菌，显示出用于沙门氏菌检测的潜能。研究表明制备的单克隆抗体3B3和3F10可特异性识别不同血清型沙门氏菌PagN蛋白，为沙门氏菌检测提供了重要生物材料。

中图分类号:

S855.1

孟闯，丁睿清，尚月月，刘钧，徐双媛，康喜龙，焦新安，潘志明. 基于沙门氏菌PagN外膜蛋白的广谱单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国家禽, 2023, 45(4): 69-75.

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