鸭腺病毒3型Fiber-2蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2023.02.008

中国家禽 ›› 2023, Vol. 45 ›› Issue (2): 46-51.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2023.02.008

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鸭腺病毒3型Fiber-2蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

魏常青，史馨瑾，吕璐，刘英楠，谢振华，陈宗艳^*，陈鸿军^*

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

发布日期:2023-02-21
作者简介:魏常青（1995-），女，博士研究生，研究方向为动物病毒学，E-mail：1014995917@qq.com

Published:2023-02-21

摘要/Abstract

摘要： 为进一步研究鸭腺病毒3型（DAdV-3）Fiber-2蛋白，研究通过PCR扩增fiber-2基因，构建pET32a-DAdV3-fiber2原核质粒，表达并纯化蛋白，以纯化的蛋白为免疫原，免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备抗Fiber-2单克隆抗体杂交瘤细胞，采用间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行鉴定，并用于DAdV-3 Fiber-2杆状病毒表达产物的鉴定。结果显示：原核表达获得1.77 mg/mL Fiber-2蛋白，筛选获得2株阳性单克隆细胞株2E10E4和4F7F10，两株单克隆抗体均为IgG 1型，轻链类型为κ；DAdV-3感染的LMH细胞中存在特异性荧光，免疫印迹试验确认在约59 ku处出现特异性条带；采用制备的单克隆抗体确认了表达Fiber-2蛋白的重组杆状病毒。研究获得了针对DAdV-3 Fiber-2蛋白的单克隆抗体，为深入探究Fiber-2在DAdV-3感染机制中的作用以及为建立DAdV-3抗原免疫测定技术奠定了基础。

中图分类号:

S855.3

魏常青，史馨瑾，吕璐，刘英楠，谢振华，陈宗艳，陈鸿军. 鸭腺病毒3型Fiber-2蛋白单克隆抗体的制备及初步应用[J]. 中国家禽, 2023, 45(2): 46-51.

[1]	庄海彬，李伟强，黄小武，叶芷羽，丘林峰，林宏文，宋亚婷，丁仰保，黄鉴妮，焦培荣. 鸡MDA5的序列分析与结构域预测[J]. 中国家禽, 2023, 45(6): 36-42.
[2]	莫一群，王雅琴，陆辉，刘莉. 禽流感病毒检测方法研究进展[J]. 中国家禽, 2023, 45(6): 82-95.
[3]	朱玮钰，李敏，杨耀炎，郭金晗，付福梅，邓乔木，韦平. clade 1.3 J亚群禽白血病病毒与Ⅱ型禽网状内皮组织增殖病病毒共感染的病原分离鉴定及其囊膜基因分析[J]. 中国家禽, 2023, 45(3): 45-51.
[4]	刘博，祖立闯，魏中锋，谷英华，毕研丽，王文秀. 鸭源新型鹅细小病毒的分离鉴定与VP1基因序列分析[J]. 中国家禽, 2022, 44(12): 34-39.
[5]	潘鹏宇，谢艾伶，吴凤明，刘鼎阔，孙英峰，尤春雪，李留安，于晓雪. 传染性法氏囊病病毒Ts株在DF-1细胞和Vero细胞中增殖能力的对比研究[J]. 中国家禽, 2022, 44(12): 46-52.
[6]	张建军，陆小龙，刘开拓，王晓泉，胡顺林，刘秀梵. 传染性支气管炎病毒与低致病性禽流感病毒共感染增强鸡支气管堵塞的研究[J]. 中国家禽, 2022, 44(12): 104-110.
[7]	王丹，侯磊，宋江伟，王菁，全荣，刘爵. 禽偏肺病毒感染Vero细胞的外泌体蛋白质组学分析[J]. 中国家禽, 2022, 44(10): 24-30.
[8]	胡亚歌，吴海洋，翟庆贺，牛晓赛，董新荣，卢尧，杨灵芝，郭建友，朱杰. 禽脑脊髓炎病毒外壳蛋白VP1的原核表达及活性鉴定[J]. 中国家禽, 2022, 44(10): 38-43.
[9]	何吉鑫，吴海洋，翟庆贺，陆庆泉，郭腾，卢尧，朱杰，牛晓赛，杨灵芝. 2017—2020年中国部分地区H9N2亚型禽流感病毒HA基因的遗传进化和分子特征分析[J]. 中国家禽, 2022, 44(9): 26-32.
[10]	马丰英，丛雁方，于春梅，黄冬，王睿智，蒋皓静，曲信芹，赵玉惠，王伟波，崔建新，蒋贻海. 新型鸭呼肠孤病毒病的研究进展[J]. 中国家禽, 2022, 44(9): 92-100.
[11]	李志昌，朱玮钰，李和鸣，梁鲜便，陈凤清，陈金清，邓乔木，祝德三，韦平. 祝氏麻鸡核心种群禽白血病净化效果评估[J]. 中国家禽, 2022, 44(9): 117-121.
[12]	梁雄燕，余连喜，孙真真，万亮，陈雪阳，陈晶，方春，顾玉芳，杨玉莹. 鸭坦布苏病毒JZ1801株分离鉴定及其E蛋白序列分析[J]. 中国家禽, 2020, 42(10): 27-32.
[13]	李甜甜，王钜华，朱国强，钱钟，杨振，徐萍，魏荣荣，李琛，何存亚，范娟. 鹅星状病毒的分离鉴定及其致病性研究[J]. 中国家禽, 2020, 42(10): 116-120.
[14]	白晓，张诚，崔明仙，段晓军，常建光，陈立功，王学静，吕建国，刘聚祥. 肉鸡H5、H7亚型禽流感病毒母源抗体消长规律及其对禽流感疫苗接种的影响[J]. 中国家禽, 2019, 41(2): 65-66.
[15]	李素华，季佳，李钰萍，刘强，段博芳，代红炀，张文东，宋建领，郭爱伟，王雯慧，尹红斌. 基于NCBI数据库的禽源H5N2 AIV的HA基因进化分析[J]. 中国家禽, 2021, 43(2): 32-38.

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