中国家禽 ›› 2022, Vol. 44 ›› Issue (5): 25-31.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2022.05.005

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基于鸡传染性支气管炎病毒Vero细胞适应株全病毒抗原的间接ELISA抗体检测方法的建立

程旭1,周生2,唐梦君1,高明燕1,俞燕1,姜逸1,3*   

  1. (1.中国农业科学院家禽研究所,江苏扬州 225125; 2.青岛农业大学,山东青岛 266109;3.扬州大学兽医学院,江苏扬州 225009)
  • 发布日期:2022-05-18
  • 作者简介:程旭(1982-),男,硕士,副研究员,主要从事传染性支气管炎防控研究,E-mail:peterchengxu@126.com

  • Published:2022-05-18

摘要: 为了对鸡传染性支气管炎(IB)疫苗的免疫效果进行有效评估,研究以QX型IBV的Vero细胞适应株为包被抗原,对检测条件进行优化,建立了IBV抗体间接ELISA检测方法。结果显示:抗原最佳包被浓度为160 μg/mL,最佳包被条件为37 ℃、2 h,封闭条件为5%脱脂奶粉、37 ℃封闭2 h,最佳抗体稀释液选择2%脱脂奶,一抗的最佳反应条件为37 ℃、60 min,二抗的最佳稀释度为1∶10 000,作用时间为60 min,底物显色时间为15 min;特异性、重复性试验证明,该方法与其他病原无交叉反应,特异性好,批内、批间变异系数较低,重复性好。研究初步建立了IBV抗体间接ELISA检测方法,可应用于免疫鸡群后抗体水平监测及早期感染预警。

关键词: IBV;Vero细胞适应株;ELISA;抗体检测

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