中国家禽 ›› 2022, Vol. 44 ›› Issue (3): 44-49.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2022.03.007

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肠炎沙门菌运动缺陷突变株的筛选 及其突变基因鉴定

黄鹏1,2,3,4*,陈敬1,2,3,4*,蔡媛1,2,3,4,刘桂凤1,2,3,4,耿士忠1,2,3,4**   

  1. (1.扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏扬州 225009; 2.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州 225009; 3.扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室,江苏扬州 225009; 4.扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室,江苏扬州 225009)
  • 发布日期:2022-03-24
  • 作者简介:黄鹏(1997-),男,硕士研究生,研究方向为食源性人兽共患病原菌,E-mail:2275519802@qq.com;陈敬(1999-),女,本科生,专业方向为食源性人兽共患病原菌,E-mail:1337786510@qq.com

  • Published:2022-03-24

摘要: 为挖掘介导肠炎沙门菌运动能力的功能基因,深入研究沙门菌运动及致病机制,采用转座子突变技术构建肠炎沙门菌C50041突变库,筛选获得运动性弱或无的突变株;在突变株运动缺陷表型确认后,提取细菌基因组DNA,PCR扩增转座子在细菌基因组中所插入的侧翼序列,并对侧翼序列进行基因测序进行Blast比对相似度,确定突变失活的基因。结果显示:从Tn5转座子突变库中筛选了10 000多株突变株,从中筛选出10株运动性缺陷的突变株,并成功 PCR 扩增每个突变株转座子侧翼序列,通过 Blast 比对初步确定 fliP、fliD、rfaL、rfbK、cpsG、csrD 6个基因的失能导致肠炎沙门菌运动缺陷,其中fliD、fliP和cpsG为鞭毛合成相关基因,rfbK和rfaL为脂多糖合成相关基因,csrD为调控基因。研究结果为进一步探讨沙门菌运动性及致病机制奠定了基础。

关键词: 肠炎沙门菌;运动性;转座子;鞭毛;功能基因

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