中国家禽 ›› 2022, Vol. 44 ›› Issue (3): 9-16.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2022.03.002

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鸡Elovl2基因组织表达谱及脂代谢功能研究

徐钰芳,孙洁,韩琪,郁建锋,徐璐*,顾志良*   

  1. (常熟理工学院生物与食品工程学院,江苏苏州 215500)
  • 发布日期:2022-03-24
  • 作者简介:徐钰芳(1999-),女,本科生,专业方向为家禽遗传育种,E-mail:1498073473@qq.com

  • Published:2022-03-24

摘要: 为探究Elovl2基因在鸡体内的生物学功能,对鸡ELOVL2蛋白的理化性质进行分析,通过RT-qPCR技术检测该基因在鸡各组织中的表达情况。将Elovl2基因过表达重组质粒与最佳干扰片段分别转染鸡LMH细胞系,通过RT-qPCR技术检测Elovl2基因及脂代谢相关基因mRNA 水平的变化,利用 GC-MS 技术检测细胞内相关脂肪酸含量的变化。结果显示:鸡ELOVL2蛋白属于稳定蛋白,该基因mRNA主要表达于脑和肝脏组织。转染pcDNA3.1-Elovl2 后,基因相对表达水平显著上升,过表达重组质粒构建成功。三组siRNA均显著抑制Elovl2基因表达,抑制效果最佳的为siRNA-681。抑制Elovl2基因表达后,pck1基因的表达量较对照组相比上升2倍,但二者差异不显著。过表达Elovl2基因后,各种脂肪酸含量均有所增加,而经 RNAi技术抑制Elovl2基因表达后,各种脂肪酸则有不同程度减少,受其影响最明显的为C22∶1N9。试验结果为进一步研究鸡Elovl2基因的功能奠定了基础。

关键词: Elovl2基因;过表达重组质粒构建;RNAi技术;RT-qPCR;鸡

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