摘要： 为建立一种特异性强、灵敏度高、重复性好的鸭坦布苏病毒（DTMUV）数字RT-PCR 定量检测方法，采用鸭坦布苏病毒E 基因为靶基因，在前期实时荧光定量RT-PCR方法的基础 上，建立了可对其准确定量的微滴式数字RT-PCR方法。通过对反应体系中引物、探针浓度以及 反应条件中反转录温度、时间、退火温度进行优化，确定最佳引物浓度为700 nmol/L，最佳探针浓 度为350 nmol/L。该方法线性关系良好，在模板浓度为100~104拷贝/μL范围内其有良好的线性 关系（R2=0.993 4）；最低检测限为6.4拷贝/反应，比相同引物探针建立的实时荧光定量RT-PCR 方法敏感一个数量级；同时，与其他禽源病毒无交叉反应，且重复性良好，对于103数量级的模 板进行重复性检测，变异系数仅1.22%。通过对临床样品进行检测，结果显示该方法与实时荧 光定量RT-PCR结果一致，表明该微滴式数字RT-PCR方法特异性强、敏感性高，可用于鸭坦 布苏病毒的定量检测。

关键词: 鸭坦布苏病毒；微滴数字RT-PCR；定量检测方法

中图分类号: 

• S855.3