摘要： 为了研究马立克氏病病毒（MDV）pUL43蛋白的表达特征，首先通过同源重组反 应构建了表达MDV pUL43蛋白的真核载体，利用生物信息学软件分析MDV pUL43蛋白的跨 膜结构、亲水性、疏水性和抗原性，选择抗原性最佳的N端第259~276位合成抗原肽，5次免疫 兔后采集血清并通过亲和层析纯化浓缩多克隆抗体，利用斑点杂交对多克隆抗体效价进行检 测，利用实时荧光定量（RT-qPCR）检测感染细胞UL43 基因mRNA转录本水平，利用间接免疫 荧光试验和蛋白免疫印迹对转染或被MDV感染细胞的pUL43蛋白进行检测。结果显示：多克 隆抗体与抗原肽的反应效价为1∶100 000；转染细胞内pUL43蛋白呈斑块聚集；814疫苗株或 GX20NNM1野毒株感染后UL43 基因在mRNA、蛋白水平上具有相似的表达动力学。在感染后 12 h检出特异性的pUL43蛋白，其表达量随感染时间延长而增加；特异条带的表观分子量在 45~50 ku。研究成功制备了特异性MDV pUL43蛋白多克隆抗体，并分析了MDV pUL43蛋白 的体外表达特征，为后续研究其生物学功能奠定了基础。

关键词: 马立克氏病病毒；pUL43蛋白；多克隆抗体；表达分析

中图分类号: 

• S855.3