中国家禽 ›› 2021, Vol. 43 ›› Issue (5): 112-116.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2021.05.018

• 研究简报 • 上一篇    

鸡传染性支气管炎病毒Real-time PCR方法的建立及应用

赵秀美,周生*,姜逸,俞燕,高明燕,程旭,戴有礼   

  1. (江苏省家禽科学研究所,江苏扬州225125)
  • 发布日期:2021-05-12
  • 作者简介:赵秀美,助理研究员,主要从事禽病病原学诊断,E-mail:xiumei_zhao@126.com

  • Published:2021-05-12

摘要: 为建立一种快速定量检测鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus, IBV)的方法,试验针对H120株5′端非编码区保守区域序列设计一对特异性引物,构建重组质粒 作为阳性标准品进行SYBR Green Ⅰ Real-time PCR,建立了定量检测IBV的标准曲线与直 线回归方程;同时,应用该方法检测三株IBV毒株在接种SPF鸡胚后不同时间段的病毒含量。 结果显示:该方法标准曲线相关系数为1,线性曲线好;最低可检测病毒的浓度为101拷贝/μL, 是常规PCR方法的100倍;与其它禽源病毒均不发生交叉反应,特异性好;批间和批内重复性 试验变异系数均小于1%;病毒含量在接种后36 h达到峰值,且rH120-S/TZ株病毒复制效率高 于H120株,rIBTZ株复制效率最低。结果表明,该Real-time PCR方法灵敏度高,特异性和重 复性好,可应用于IBV的定量检测。

关键词: 鸡传染性支气管炎病毒;荧光定量PCR;病毒检测

中图分类号: