中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (12): 36-41.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.12.007

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鸡宿主限制因子SAMHD1单克隆抗体的制备与鉴定

俞燕,李建梅,周生,徐步*,高明燕,姜逸,程旭,沈欣悦,韦玉勇   

  1. 俞燕,博士,副研究员,主要从事家禽疫病病原学及防控技术研究,E-mail:yuyan_1020@126.com
  • 发布日期:2021-01-15
  • 作者简介:(江苏省家禽科学研究所,江苏扬州225125)

  • Published:2021-01-15

摘要: 为探讨鸡源宿主限制因子SAMHD1(chSAMHD1)的功能及作用机制,研究将前期 制备并纯化的chSAMHD1原核表达蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,应用细胞融合技术筛选单克 隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗chSAMHD1单克隆抗体。结果显示:经间接ELISA筛选和2次亚 克隆最终获得了5株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A8-2-1、1A12-1-8、 2B9-7-6、1F5-1-4、1F7-7-7,小鼠腹水效价较高的1A8-2-1和2B9-7-6抗体亚型均为IgG1; 间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定结果均表明,单克隆抗体1A8-2-1可 特异性识别293T细胞和DF-1细胞过表达的chSAMHD1蛋白。该研究成功获得了特异性抗 chSAMHD1单克隆抗体,可用于ELISA、IFA和Western blot检测,为鸡源SAMHD1蛋白生物学 功能的研究奠定基础。

关键词: chSAMHD1;单克隆抗体;间接免疫荧光;蛋白免疫印迹

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