鸡Ⅱ型星状病毒绝对定量real-time PCR的建立及应用

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2020.12.006

中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (12): 30-35.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.12.006

鸡Ⅱ型星状病毒绝对定量real-time PCR的建立及应用

赵伟^1，2*，武宗仪^1，2*，秦爱建^1，2,3，钱琨^1，2,3,4**

赵伟（1995-），男，硕士研究生，研究方向为家禽病毒学，E-mail：841412338@qq.com；武宗仪（1994-），男，硕士研究生，研究方向为家禽病毒学，E-mail：1743373182@qq.com

发布日期:2021-01-15
作者简介:（1.扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室，江苏扬州225009； 2.扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室，江苏扬州225009； 3.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州225009； 4.扬州大学比较医学研究院，江苏扬州225009）

Published:2021-01-15

摘要/Abstract

摘要： 研究旨在建立一种检测鸡Ⅱ型星状病毒（CAstV）绝对定量的检测方法。采用 PCR方法扩增Ⅱ型CAstV保守区域基因RdRp 部分基因，将其克隆至pGEM-T载体作为阳性标准质粒，并根据获得的RdRp 基因设计合成一对133 bp引物，成功建立了Ⅱ型CAstV的绝对定量real-time PCR的检测方法。结果显示：研究构建的检测方法线性关系良好，检测灵敏度为 10 copies/μL，且对常见的禽源病毒均无非特异性扩增，特异性好。应用建立的绝对定量real-time PCR检测了病毒感染1日龄雏鸡不同组织样品，掌握了鸡Ⅱ型星状病毒在鸡体内不同组织内的分布及增殖情况。试验成功建立了Ⅱ型CAstV绝对定量real-time PCR检测方法，该方法特异性强、灵敏度高、重复性好，为进一步深入研究Ⅱ型CAstV的生物学特性提供了检测手段。

中图分类号:

S855.3

赵伟，武宗仪，秦爱建，钱琨. 鸡Ⅱ型星状病毒绝对定量real-time PCR的建立及应用[J]. 中国家禽, 2020, 42(12): 30-35.

[1]	孙一宁，王翊珺，张蕾，郑新新，王国庆，胡娇. LncRNA 053065对高致病性H5N1亚型禽流感病毒复制能力的影响及其机制初步探索[J]. 中国家禽, 2021, 43(9): 29-36.
[2]	何书海，李军，郑高颖，董建国，杨琳，黄立. CD4+ CD25+调节性T细胞与鸡REV持续性感染的相关性研究[J]. 中国家禽, 2021, 43(9): 37-43.
[3]	刘洋，李翔，原霖，张硕，王传彬，连红岩，张良一，顾小雪. 鸭坦布苏病毒微滴式数字RT-PCR定量检测方法的建立与初步应用[J]. 中国家禽, 2021, 43(8): 25-29.
[4]	韩雯雯，蔡淼，刘秀梵，王晓泉. 血凝素蛋白稳定性对流感病毒生物学特性影响的研究进展[J]. 中国家禽, 2021, 43(8): 83-87.
[5]	史爱华，赵蕾，李林，张建伟，沈佳，习硕，姜北宇，彭湃，阮继湘，章振华. 鸡传染性支气管炎病毒M41株鸡胚增殖工艺研究[J]. 中国家禽, 2021, 43(8): 106-110.
[6]	刘潇，宋佳玲，张金城，马德青，韦平，黄腾. 马立克氏病病毒多次跨膜蛋白pUL43 多克隆抗体的制备及其体外表达分析[J]. 中国家禽, 2021, 43(7): 37-43.
[7]	徐熙皓，徐海银，赵伟，秦爱建，钱琨. Ⅱ型鸡星状病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达以及多克隆抗体的制备[J]. 中国家禽, 2021, 43(7): 44-49.
[8]	杜旭彬，赵佳郭梦娇，李敏，张成，吴艳涛，张小荣. 传染性支气管炎病毒N蛋白广谱单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国家禽, 2021, 43(5): 27-32.
[9]	刘鹏，汪最，毛晓惠，梁桂星，邵华斌，汪招雄，罗青平. 2株鸭源新型鹅细小病毒分离鉴定及遗传进化分析[J]. 中国家禽, 2021, 43(5): 33-40.
[10]	赵秀美，周生，姜逸，俞燕，高明燕，程旭，戴有礼. 鸡传染性支气管炎病毒Real-time PCR方法的建立及应用[J]. 中国家禽, 2021, 43(5): 112-116.
[11]	梁雄燕，余连喜，孙真真，万亮，陈雪阳，陈晶，方春，顾玉芳，杨玉莹. 鸭坦布苏病毒JZ1801株分离鉴定及其E蛋白序列分析[J]. 中国家禽, 2020, 42(10): 27-32.
[12]	李甜甜，王钜华，朱国强，钱钟，杨振，徐萍，魏荣荣，李琛，何存亚，范娟. 鹅星状病毒的分离鉴定及其致病性研究[J]. 中国家禽, 2020, 42(10): 116-120.
[13]	白晓，张诚，崔明仙，段晓军，常建光，陈立功，王学静，吕建国，刘聚祥. 肉鸡H5、H7亚型禽流感病毒母源抗体消长规律及其对禽流感疫苗接种的影响[J]. 中国家禽, 2019, 41(2): 65-66.
[14]	李素华，季佳，李钰萍，刘强，段博芳，代红炀，张文东，宋建领，郭爱伟，王雯慧，尹红斌. 基于NCBI数据库的禽源H5N2 AIV的HA基因进化分析[J]. 中国家禽, 2021, 43(2): 32-38.
[15]	邹桂莲，张文婷，赵宗正，王红琳，汪宏才，罗玲，张蓉蓉，张腾飞，罗青平，邵华斌，温国元，商雨，杨烨. 利用昆虫表达系统表达新城疫病毒TS09-C耐热株的HN蛋白胞外区[J]. 中国家禽, 2021, 43(2): 37-44.

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