鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的
原核表达和多克隆抗体的制备

doi:10.16372/j.issn.1004-6364.2020.06.008

中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (6): 42-47.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.06.008

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鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的原核表达和多克隆抗体的制备

李海宾^1，2，冯政^1，2，仲艳^1，2，王希玉^1，2，李超^1，2，秦涛^1，2，3，陈素娟^1，2，3，彭大新^1，2，3*

（1.扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009； 2.江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州 225009； 3.江苏省家禽疫病防控工程技术研究中心，江苏扬州 225009）

发布日期:2021-12-02
作者简介:李海宾（1994-），男，硕士研究生，研究方向为预防兽医学，E-mail：791590048@qq.com

Published:2021-12-02

摘要/Abstract

摘要： 为制备鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的特异性多克隆抗体（多抗），以鼠伤寒沙门菌S025为供体菌，PCR扩增sseB和sseL基因，插入原核表达载体pGEX-6P-1，转化BL21（DE3）感受态细胞进行诱导表达，获得纯化蛋白免疫小鼠制备多抗；使用λ-red同源重组方法构建 sseB和sseL基因缺失株；通过野生株和缺失株的Western-blot分析验证制备血清的特异性。结果显示：成功构建出重组质粒pGEX-6P-1-sseB和pGEX-6P-1-sseL，转化感受态细胞后，在 IPTG 1 mmol/L、温度28 ℃、转速为220 r/min、诱导时间12 h的条件下，SseB和SseL蛋白呈可溶性表达；纯化蛋白免疫小鼠制备了多抗，Western-blot分析显示该多抗可特异性检测鼠伤寒沙门菌中的SseB和SseL蛋白。这两种蛋白多抗的获得为进一步研究其功能奠定基础。

中图分类号:

S855.1

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