中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (4): 15-19.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.04.003

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鸡肝细胞中C/EBPα基因的敲低 及对糖脂代谢相关基因表达的影响

张燕萍,李柯晔,王中亮,曾 屾,苏媛媛,吴玉婷,金 晶,顾志良*   

  1. (常熟理工学院生物与食品工程学院,江苏常熟 215500)
  • 发布日期:2021-12-02
  • 作者简介:张燕萍(1980-),女,硕士,实验师,主要从事动物资源研究,E-mail:648726365@qq.com

  • Published:2021-12-02

摘要: C/EBPα即CCAAT/增强子结合蛋白α基因,其编码的CCAAT/增强子结合蛋白是重 要的转录调控因子,在细胞的分化和代谢过程中发挥着重要的调节作用。试验利用RNAi来敲低 鸡 LMH 细胞系中 C/EBPα基因的表达,以研究 C/EBPα基因影响脂肪代谢的机制。根据鸡 C/EBPα基因的mRNA序列,设计3对siRNA,用RNAi干扰技术来敲低鸡LMH细胞中的C/EBPα 基因表达,然后用荧光定量PCR检测C/EBPα基因的表达情况,发现其中的C/EBPα-siRNA-161 能够显著降低C/EBPα基因的表达;并将C/EBPα-siRNA-161转染LHM细胞后48 h后,利用荧 光定量 PCR 检测 LMH 细胞中糖脂代谢相关基因(PCK1、SCD、GLUT2、PPARγ、INS、G6PC、 IGF1、IGF2、INSR、STAT3)的表达,发现在LMH细胞中PCK1、G6PC、GLUT2基因的mRNA表达 量下降,结果表明C/EBPα基因能影响糖代谢相关基因G6PC、GLUT2、甘油异生相关基因PCK1 的表达,证实了C/EBPα基因对鸡肝细胞中的糖脂代谢具有调控作用,通过调控C/EBPα基因的 表达将影响糖吸收及甘油异生。

关键词: LMH细胞系;C/EBPα基因;基因敲低;荧光定量PCR;糖脂代谢

中图分类号: