中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (1): 38-43.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.01.008

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禽网状内皮组织增生症病毒MD-2株 感染性克隆的构建与突变分析

黄小洁,孔冬妮,刘 丹,陈晓春,杨 飞,侯力丹,李俊平*   

  1. (中国兽医药品监察所,北京 100081)
  • 发布日期:2021-12-01
  • 作者简介:黄小洁,女,硕士,助理研究员,主要从事禽用疫苗检验及相关研究,E-mail:fjhxj168@126.com

  • Published:2021-12-01

摘要: 为构建禽网状内皮组织增生症病毒(REV)MD-2株的感染性克隆,将MD-2株的前病 毒基因组全长克隆至pMD18-T Simple载体中构建MD-2全长质粒,经转染CEF细胞后进行病 毒拯救及鉴定,并对拯救病毒进行了生物学特性研究。结果表明,成功构建了MD-2全长质 粒,拯救病毒感染CEF细胞后用间接免疫荧光试验检测到病毒抗原;拯救病毒的生长特性与亲 本病毒相比无明显差异。随后对env基因进行了多个位点的定点突变,并拯救出相应的突变株, 结果显示env基因第1433位碱基突变后不能拯救出病毒,推断1433位的突变为致死性突变。 MD-2株感染性克隆的构建和病毒拯救的研究为继续研究REV基因和蛋白功能提供了技术支持。

关键词: 禽网状内皮组织增生症病毒;感染性克隆;构建;突变

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