摘要: 为获得293T细胞表达的ALV-J gp85蛋白,研究通过PCR扩增ALV-J gp85基因, 利用基因克隆技术克隆 pMD-18T-gp85 并测序,进而构建表达质粒 pEGFP-N1-gp85。利用 293T 细胞对重组表达质粒进行表达,通过荧光显微镜和 Western blot 检测重组表达质粒 (pEGFP-N1-gp85)的表达情况。结果显示,pEGFP-N1-gp85重组表达质粒在293T细胞中均 匀分布,说明pEGFP-N1-gp85重组表达质粒在293T细胞中表达;pEGFP-N1-gp85重组表达 质粒在293T细胞中表达的蛋白质分子质量约为60 ku。结果表明,成功构建了真核表达质粒 pEGFP-N1-gp85,并在293T细胞中获得了表达,为研制ALV-J-gp85 DNA核酸疫苗提供了科 学支撑。
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